首先我们来说一下溴化氰标准曲线的制定情况：

  将溴化氰标准液间隔200ng稀释6个样品，每个样品间隔15分钟测定两次，以标准品浓度为横坐标，A值为纵坐标绘制标准曲线。见下表3和图2：

  其次是供试品测定：

  将两批A群脑膜炎球菌多糖-AH衍生物适当稀释，用吡啶联苯胺法，重复性试验，每批在15、30分钟各测定六次，根据供试品A值，在同时测定的标准曲线上查出相应的溴化氰含量。结果见下表：

  A群脑膜炎球菌多糖分子结构为N-乙酰-3-O-乙酰甘露糖胺磷酸盐α-（1-6）连接的多聚体，在C3位约百分之九十的糖残基带有O-乙酰基。多糖没有羧基基团和末端醛基可以和蛋白质载体的氨基直接供价结合。溴化氰作为活化剂在多糖分子上形成亲电子基团，可使带有氨基的配体与带有邻位羧基的糖残基供价结合，经溴化氰活化的多糖与已二酰肼（ADH）形成多糖-AH衍生物，在EDAC的作用下与载体蛋白质偶联，其蛋白/多糖比率提高四倍。

  已二酰肼在多糖与蛋白质之间起到连接的作用。活化多糖与已二酰肼的衍化率（多糖-AH衍生物）高低影响蛋白/多糖比率，从而影响A群脑膜炎球菌结合疫苗的免疫原性；而为了保证结合疫苗的安全性必须用透析法除去溴化氰。

  因此，评价已二酰肼和溴化氰检测方法的精密度、重复性时非常必要的。虽然已二酰肼含量测定过程中，随着时间延长，A值升高，但因每次测定供试品的同时测定标准品，从而抵消了检测误差。试验结果表明，以上两种方式是检测多糖-AH衍生物含量和溴化氰残余量较为理想的方法，该研究为建立A群脑膜炎球菌结合疫苗的质量检测方法和标准提供了依据。