公司首页关于我们新闻中心产品展示销售网络在线留言联系我们
联系我们

  淄博齐安化工有限公司

  手机:13589528700 / 18663080666

  传真:0533-3585355

  QQ:1799909200

  邮箱:luyong1975@126.com

  办公地址:山东省淄博市高新区万杰路93号410室

 

您现在所在的位置:公司新闻->产品知识
时间:[2018/4/1]

   从电泳结果(图1)可以看出,当溴化氰与Met的摩尔数比较低时(50∶1)切割效率很低,当比例为250∶1时有较高的切割效率,但继续增加比例切割效果没有明显变化。

图1 Trieine-SDS-PAGE 检测不同量的溴化氰的切割效果

  而盐酸浓度及不同溶剂对切割效率的影响为:

  从电泳结果(图2)可以看出,在8 mol/L尿素溶液(含0.1 mol/L HCl),8 mol/L尿素溶液(含1 mol/LHCl)中都出现了目的肽段(Mr2 200处)且盐酸浓度越高切割效率越高,而在8 mol/L尿素溶液中切割效率极低。

图2 Tricine-SDS-PAGE 检测不同条件下溴化氰切割包涵体的效果

  M.低Mr蛋白标准:

  (1)溴化氰在8mol/L尿素溶液的条件下裂解包涵体的结果;

  (2)溴化氰在8mol/L尿素溶液(含0.1mol/L HCl)的条件下裂解包涵体的结果;

  (3)溴化氰在8mol/L尿素溶液(含1mol/L HCl)的条件下裂解包涵体的结果;

  (4)溴化氰在百分之七十甲酸的条件下裂解包涵体的结果。

  在百分之七十甲酸中虽然融合蛋白被切割但是肽段切割不完全,没有切割出目的肽段(可能是G13与前面含有7个氨基酸的阴离子肽段之间的Met没有被切割),说明高效率的溴化氰切割需要在酸性条件下进行,且溴化氰在促溶剂(尿素)的酸溶液中切割融合蛋白比在百分之七十甲酸中切割的更完全,更有利于小肽切割。

相关新闻