溴化氰生产企业发现尽管碳极二咪唑用于活化琼脂糖凝胶具有一系列的优点,但是在操作中溴化氰公司建议用户注意以下事项以获得活化的高成功率:
(1)在称量碳极二咪唑时不要深呼吸,不要直接接触试剂;
(2)在活化时注意二氧六环是否是无水,溴化氰生产企业发现如果含有水份,碳极二咪唑将被水解,导致活化效率降低;
(3)在洗涤和溶液置换过程中树脂不能被抽干;
(4)碳极二咪唑一定要保存在低温干燥环境中,防止其水解
(5)溴化氰生产企业发现在树脂活化后,从无水二氧六环中置换到水溶液中时,不要过于忙乱,尽管在置换过程部分活化后的咪哇基团会被水解下来,但是水解的速度远比游离碳极二咪唑慢;
(6)务必将游离的碳极二咪唑洗干净;
(7)虽然偶联可以在室温下进行,但是最好在低温下操作(可以适当延长时间);
(8)偶联后的树脂一定要把残留的配基清洗干净并置于四摄氏度,不可将其放在零摄氏度以下保存。
另外,环氧类试剂也是较为安全的活化剂。但是,溴化氰生产企业发现该活化剂同样导致树脂获得较强电荷基团,非特异性吸附十分明显,空间位阻也较为明显,偶联率较低。同时,由于环氧剂的氧化性很强,在固定化酶的制备中,还原氨基酸的侧链基团将受到破坏,因此在使用该活化剂时应该考虑这一因素。由于还原性氨基酸被活化剂反应而被破坏,其应用范围将受到一定的限制。
近年来,溴化氰生产企业发现某些新的固定化酶技术也开展起来,如磁性固定化、膜固定化等,但是这些技术有待于进一步完善和发展。