溴化氰生产厂家—淄博齐安化工有限公司生产的溴化氰产品，主要用作杀菌剂及军用毒气，也用于氰化物的制备、有机合成等方面。溴化氰（化学式：CNBr）可以专一性的切割甲硫酸羟基端的肽键，且很少发生非特异性切割，是裂解融合蛋白最常用的试剂。

  然而用溴化氰裂解融合蛋白质有时也会遇到一些困难。研究人员用70%甲酸溶解包涵体，融合蛋白也不能被溴化氰裂解，说明溴化氰切割融合蛋白的效果受多种因素的影响。

  现通过分析多种因素对溴化氰切割效率的影响，发现溴化氰在促溶剂（8mol/L尿素）的酸溶液中有较高的切割效率，切割效果可满足后续实验的要求。其讨论情况如下：

  一般在溴化氰切割效率比较低的情况下，会通过增加溴化氰的量来提高切割效率。本实验通过分析发现当溴化氰的摩尔数与融合蛋白中Met的摩尔数满足一定的比例时（大约250:1），再增加溴化氰的量切割效率也没有明显变化，因此要注意避免继续增加溴化氰的量而增加操作危险性。

  本实验通过分析酸浓度及不同溶剂对切割效率的影响，发现进行溴化氰消化作用的反应介质时决定此方法是否成功的关键。酸性环境是溴化氰裂解融合蛋白所必须的，低pH环境可以通过抑制甲硫氨酸侧链的氧化而提高切割效率。且酸性越强越有利于亲核基团（经基、氨基）的质了化作用，越有利于裂解反应的进行；而使用促溶剂的酸溶液作为反应介质比70%甲酸更有利于融合蛋白中甲硫氨酸残基的暴露，便于小肽裂解，增加切割效率。

  在进行溴化氰切割融合蛋白的反应时，建议优先使用促溶剂（尿素等）的酸溶液作为溴化氰裂解融合蛋白的反应介质。尤其是对包涵体来说促溶剂比70%甲酸的溶解效果更好。

  因此，本实验认为溴化氰在反应介质（8mol/L尿素，0.1mol/LHCl）中切割包涵体蛋白比较合适（可以根据实际情况调整酸浓度以提高切割效率），切割后的产物可以满足小肽的分离钝化等后续实验的要求。