一、溴化氰用量与活化温度的影响

  在中性条件下，溴化氰用量与凝胶活化之间呈线性关系，但高度活化会改变凝胶的物理性质。文献认为溴化氰用量为30mg/ml凝胶，即可获得满意的活化效果，实验结果要达50mg/ml凝胶。固定溴化氰用量为50mg/ml凝胶，活化温度分为为：4，-10，-15，-20摄氏度时，得到DSA偶联率分为为百分之五十八，百分之七十七点九，百分之八十一点一，百分之七十九点二，结果表明，在中性条件下活化温度控制在-10至20摄氏度可获得较好的效果。

  二、活化时间的影响

  将溴化氰用量固定在50mg/ml凝胶，活化温度为-15摄氏度，改变溴化氰活化Sepharose 4B的时间分别为5，10，15，20分钟。DSA偶联率分别为：百分之六十九点八，百分之七十七点八，百分之七十九，百分之七十八。结果表明，活化10至20分钟DSA凝集素的偶联率变化不明显。最后确定活化时间为10分钟。