用溴化氰活化琼脂糖免疫吸附剂纯化抗原、抗体或其它生物大分子是亲和层析法中的重要内容之一。溴化氰活化琼脂糖免疫吸附剂的依据是抗原(或抗体)可以和它们相应的配体—抗体(或抗原)进行专一的结合,而这种结合在一定条件下使可逆的。若将该溴化氰吸附剂抗原(或抗体)固化化后,就可使与之接触的溶液中的抗体(或抗原)被结合在固相配体上,从而达到分离提纯的目的。
溴化氰活化琼脂糖微球是一种常用的方法,其步骤如下:
琼脂糖+溴化氰→活化琼脂糖=NH+溴氢酸
用免疫吸附剂纯化抗原(或抗体)的步骤如下:
由于溴化氰毒性极大,琼脂糖活化时又需要不断滴加氢氧化钠来维持恒定的碱性pH,不仅操作繁琐,还需要较好的防护设施,从而增加了制备时的困难。溴化氰研究人员通过改用5M碱性磷酸钾缓冲液维持活化时要求的碱性pH制备免疫吸附剂,不仅操作简便,实验的重复性也较好。