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  淄博齐安化工有限公司

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时间:[2017/10/24]

   溴化氰亲和层析直到现在常用的介质就是琼脂糖胶粒。琼脂糖胶粒它具有机械强度高、透性好、载体本身非特异性吸附少等优点。它是由吸附层析衍生、发展起来的分离技术。溴化氰主要是根据生物分子与特定的固相化配基之间的亲和力而使生物分子得到分离。利用亲和层析载体固相化配基与亲和互补物之间通过范德华力、疏水力、静电力、氢键作用等发生专一性的结合而进行分离。在亲和层析过程中,被纯化的生物分子在一定的条件下,选择性地结合到被共价偶联到不溶性载体上的配基上,然后改变原有的条件,如洗脱液的PH  值、离子强度、有机溶剂的浓度等,溴化氰有选择性地从载体上把被分离物洗脱下来。这种有选择性地结合主要归结于固相化配基与亲和互补物二者之间的生物学特性和特异的化学结构以及空间构象。通过亲和层析法分离的物质,其纯度、活性回收率及纯化倍数均较高。

  除了氨基能偶联外,也能与巯基发生偶联反应。另一种与配基的偶联方式是插入”手臂”。在亲和层析中如果要以一个小分子作为配基(如胺类),而被分离物(亲相互补物)又是一个大分子,二者在结合过程中就会受到空间阻碍,影响结合效果。

  溴化氰亲和层析的载体要选用机械强度高、非特异性吸附少、水不溶性的、具有较多化学反应基团—羟基的多糖类介质,该载体在温和条件下与配基共价偶联,而又不影响配基及被分离物质原有的生物学特性。

  1967年Porath  和Ernback  报道了采用溴化氰可将含有氨基的有机分子偶联到多糖基上,使得亲和层析技术向前推进了一大步。直到目前,溴化氰活化载体还是用得最多,效果最好的活化方法。1971年Porath  又报道了应用环氧氯丙烷在碱性条件下活化载体的方法,克服溴化氰由于剧毒给操作带来的不便,使活化载体的方法简便易行,亲和层析技术得到广泛的应用。

  淄博溴化氰公司了解到可用于活化载体的活化剂有几十种之多,但常用的是溴化氰、环氧氯丙烷、1.4—丁二醚、戌二醛等。采用环氧氯丙烷为活化剂,sepharose  4B  为载体,鸡卵类粘蛋白为配基可合成适用于分离胰蛋白酶的亲和吸附剂。简单来说亲和层析是利用生物分子间的亲和力而进行分离的一种层析技术近十多年来,亲和层析发展十分迅速,尤其是对那些分离流程长、难度大等,如结合蛋白、酶、抗体、激素受体、糖蛋白及多糖类等,分离生物分子采用常规方法难以进行分离的,其显示出其独特的优越性。也可用于分离细胞、病毒等。已经广泛应用于生物分子的分离和纯化称为亲和层析

  淄博溴化氰公司目前常用的载体是琼脂糖胶粒。它具有机械强度高、透性好、载体本身非特异性吸附少等优点。除此以外,其他可用作载体的材料还有纤维素、葡聚糖凝胶(SePhadex)、多孔硅胶、树脂等。但是它们都具有不同程度的非特异性吸附,因此目前使用的并不多。

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